Description:

Invenţia se referă la un procedeu de obţinere şi menţinere în cultură a celulelor de tip epitelial din ţesutul mamar normal, celulele fiind utlizate în domeniul medical pentru studii funcţionale şi moleculare. Procedeul conform invenţiei are următoarele etape: a. în prima etapă se obţin celule în suspensie monocelulară prin procesare mecanică şi digestie enzimatică, urmată de cultivarea acestora pe plăci acoperite de substrat de colagen/fibronectină/laminină în mediu selectiv specific celulelor epiteliale, rezultând celule cu fenotip epitelial şi recapitulare a arhitecturii 3D a ţesutului mamar normal, b. realizarea substratului de cultivare de tip epitelial obţinute din ţesutul mamar normal care este constituit din soluţie de colagen/fibronectină/laminina la concentraţii finale în tampon fosfat salin de: 20 μ g/ml PBS colagen, 10 μ g/ml PBS soluţie de fibronectină şi 10 μ g/ml PBS laminină, şi c. selecţia celulelor, obţinute ca suspensie monocelulară prin procesarea ţesutului mamar normal, se face folosind un mediu selectiv care este format astfel: DMEM/F12 - HAM fără fenol red, 15% ser fetal bovin, 100 U/ml penicilin, 100 μ g/ml, 100 μ g/ml streptomicin, 2 mM L - glutamină, 1% aminoacizi neesenţiali, 100 μ g/ml toxină holerică, 40 ng/ml EGF ( Epidermal Growth Factor ), 40 ng/ml bFGF ( basic Fibroblast Growth Factor), 20 nM dexametazonă şi 2% ITS ( insulin, transferină, selenium).