Description:

Invenţia se referă la o metodă de detecţie şi dozare a mutaţiilor de tip FLT3-ITD din gena flt3, aplicabilă pentru diagnosticul sau monitorizarea evoluţiilor patologiilor de natură hematologică asociate cu mutaţiile FLT3-ITD. Metoda conform invenţiei constă în aceea că se realizează amestecuri de reacţie conţinând enzima ADN polimerază, clorură de sodiu, clorură de magneziu, 4 tipuri de dezoxinucleotide, două tipuri de primeri în concentraţie de 2,5 micromolar fiecare, două tipuri de sonde, în concentraţie de 350 nanomolar fiecare, după care se adaugă o soluţie uleioasă, rezultând o emulsie de picături uleioase care este supusă unei reacţii PCR digital în emulsie, ddPCR, pentru detecţia fluorescenţelor caracteristice substanţelor eliberate prin degradarea sondelor, la nivelul fiecărei picături de ulei din amestecul de reacţie, astfel că fluorescenţa markerului este o măsură a numărului total de molecule FLT3 din amestecul de reacţie, şi un control pozitiv al reacţiei PCR.